米乐m6小罗在线登录·液相色谱仪设备简介及案例分析
发布时间:2024-12-23 07:49:50 来源:米乐m6官网老版 作者:M6米乐手机登录APP入口 阅读[48]

  在色谱法中存在两相,一相是固定不动的,我们把它叫做固定相;另一相则不断流过固定相,我们把它叫做流动相。

  色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。

  使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的各组分与固定相发生相互作用。

  由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。

  用于分离、分析、纯化有机化合物(包括通过化学反应转变为有机化合物),由于其分离分析的高灵敏度、定量的准确性、适合非挥发性和热不稳定组份的分析。主要应用于有机物含量及纯度分析、药物分析、食品安全检测、农兽药残留的检测、食品中违禁物质和有害添加剂的检测、保健品效成分的检测。

  色谱图的横坐标是时间,纵坐标是响应信号。横坐标的保留时间是定性的参数,即每一个色谱峰代表一个组分,如图3测试案例,在色谱图中出现了两组色谱峰,这两组峰代表样品中含有两种不同的组分,9.877min为主峰,峰面积占比99.947%,4.481min为杂质峰,峰面积占比0.053%,使用面积归一法计算出主成分的纯度约为99.947%。

  ①定量分析是在定性分析的基础上,需要纯物质作为标准样品。液相色谱的定量是相对的定量方法,即:由已知的标准样品推算出被测样品的量。液相色谱法定量的依据被测组分的量(W)与响应值(A)(峰高或峰面积)成正比,W=f×A。定量校正因子(f):是定量计算公式的比例常数,其物理意义时单位响应值(峰面积)所代表的被测组分的量。

  由已知标准样品的量和其响应值可以求得定量校正因子。测定未知组分的响应值,通过定量校正因子即可求得该组分的量。

  常用的定量方法有外标法和内标法,外标法在液相色谱中用的最多。用被测化合物的纯品作为标准样品,配制成一系列的已知浓度的标样。注入色谱柱的到其响应值(峰面积)。

  在完全相同的实验条件下,注入未知样品,得到欲测组分的响应值。根据已知的系数f,即可求出欲测组分的浓度。

  ②紫外检测器是应用最广泛的检测器,其优点很多,如灵敏度高,线性范围宽;死体积小;波长可选;对流速和温度变化不敏感;可用于梯度洗脱。

  紫外检测器基本原理:试样组分对特定波长的紫外光具有选择性的吸收,吸光度与试样组分浓度之间的定量关系符合郎伯比耳定律。

  1、粉体样品需要提供20mg以上,液体样品需要提供0.5mL以上,在常规溶剂中溶解性较好,被检测样品组分有紫外吸收。

  4、所有色谱质谱类测试,涉及参数往往很多。我们会依据您的参考文献,结合实验室现存条件与经验,尽量使用相同或者相似的参数或配件。


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